Skim milk powder脫脂奶粉（WB專用）

簡要描述：脫脂奶粉，脂肪含量低，蛋白含量高。配制成0.3~5%的水溶液使用。

產(chǎn)品分類

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詳細介紹

品牌	BIOHUB	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	作為抗體反應(yīng)等的印跡封閉溶液使用	應(yīng)用領(lǐng)域	生物產(chǎn)業(yè),制藥

western blot中脫脂奶粉的作用

封閉

原理：用非抗原的蛋白去封閉膜的蛋白質(zhì)結(jié)合位點，避免標記抗體固定在膜上引起背景增高，常用的封閉液有BSA,脫脂奶粉,明膠, tween-20等,一般脫脂奶粉。

實驗步驟：

5%脫脂奶粉（用1x TBS配制，或1xTBST配制）封閉一晚上或室溫1~2小時

當一抗為抗磷酸化抗體時，脫脂奶粉由于含有較多磷酸化蛋白，請改為使用BSA。

2，一抗、二抗孵育

原理：一抗可以與要檢測的蛋白特異結(jié)合，二抗可與一抗結(jié)合，同時二抗上帶有特異的酶（如辣根過氧化物酶HRP，堿性磷酸酶法AP等 ),標記酶可以分解化學顯色底物產(chǎn)生有顏色的條帶或催化化學發(fā)光底物使膠片感光。

實驗步驟：

一抗孵育：5%脫脂奶粉稀釋一抗到合適的濃度，與膜室溫孵育1小時或4度一晚上（抗體濃度及孵育時間需根據(jù)不同的抗體做相應(yīng)調(diào)整， 1xTBST，洗膜3次，每次5分鐘。

二抗孵育：5%脫脂奶粉稀釋二抗到合適的濃度，與膜室溫孵育1小時， 1x TBST,洗膜3次，每次5分鐘。

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