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凋亡和焦亡的區(qū)別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞焦亡同為細(xì)胞程序性死亡,均可出現(xiàn)染色質(zhì)凝聚、核濃縮以及均依賴半胱天冬酶,但二者在諸多方面都大相徑庭,其具體區(qū)別如下:細(xì)胞凋亡細(xì)胞焦...
Q1:配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時能否有血清的存在?血清的存在會影響脂質(zhì)體的形成,建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時采用無血清培養(yǎng)基(一般推薦MEM培養(yǎng)基)。Q2:轉(zhuǎn)染試劑能否凍存?不能。本試劑一定要4℃保存,要注意避免反復(fù)多次長時間開蓋,長時間開蓋會導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。Q3:使用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑需要注意什么?1)細(xì)胞鋪板密度較高,以90%-95%為佳;2)使用高純度的DNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率;3)制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑;4)轉(zhuǎn)染的時候...
導(dǎo)讀FastBlockingWestern(快速封閉液)是最新一代的即用型、高效快速Western封閉液。封閉時間僅需10分鐘,效果優(yōu)于脫脂奶粉、BSA、酪蛋白等傳統(tǒng)封閉液,簡化了Western實驗方案。該試劑不含有哺乳動物來源的蛋白成分,避免與抗體發(fā)生交叉反應(yīng)。該試劑可與磷酸化的抗體以及NC膜和PVDF膜兼容。PART01封閉原理轉(zhuǎn)膜結(jié)束后,需對轉(zhuǎn)印膜進(jìn)行封閉。在轉(zhuǎn)印膜上未結(jié)合蛋白的位置,有許多非特異性的結(jié)合位點,為避免其與抗體發(fā)生非特異性結(jié)合引起高背景,需使用含有惰性蛋白...
1.Oligo(dT)Oligo(dT)是多聚胸腺嘧啶、T重復(fù)寡核苷酸,就是只有胸腺嘧啶組成的核苷酸鏈。因為Oligo(dT)與mRNA的Poly(A)尾巴可以發(fā)生特異性結(jié)合,所以用Oligo(dT)特異結(jié)合到mRNA上Poly(A)尾端,因此,主要用于逆轉(zhuǎn)帶有Poly(A)尾的mRNA。例如模板為真核生物來源,Oligo(dT)可與mRNA的3’Poly(A)尾配對,有利于長鏈或全長mRNA的逆轉(zhuǎn)錄。但是,其對RNA樣品的質(zhì)量要求較高,不允許其降解,否則全長cDNA合成量會...
mRNA疫苗相關(guān)產(chǎn)品-起發(fā)生物一、mRNA疫苗生產(chǎn)可分為兩大塊:mRNA制備和脂質(zhì)微粒進(jìn)行包封mRNA疫苗生產(chǎn)可分為兩大塊,可以類比為“原料藥”(mRNA)的生產(chǎn)和純化,以及“制劑”(利用脂質(zhì)微粒進(jìn)行包封)階段。原料藥(mRNA)生產(chǎn)涉及DNA原液制備和mRNA原液的制備,mRNA原液的制備(體外轉(zhuǎn)錄),是整個mRNA工藝流程中核心的步驟,而原料主要是酶。(一)mRNA疫苗的生產(chǎn)mRNA疫苗生產(chǎn)可分為兩大塊,原料藥(mRNA)的生產(chǎn)以及制劑(利用脂質(zhì)微粒進(jìn)行包封)階段。mRN...
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)創(chuàng)建于二十世紀(jì)初,歷經(jīng)一個多世紀(jì)的發(fā)展,現(xiàn)在已成為生命科學(xué)領(lǐng)域越來越重要的實驗技術(shù)之一。由于細(xì)胞的特殊性,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,或在細(xì)胞建株和建系過程中,隨著傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞的各種生物特性都會逐漸發(fā)生變化。因此,原始細(xì)胞種子的及時保存就顯得尤為必要。在雜交瘤單抗的制備過程中,雜交瘤細(xì)胞以及克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存,是bi不可少的操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候,在細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異...
目前中國國內(nèi)市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。匯總了多家用戶和血清經(jīng)銷商以及網(wǎng)絡(luò)的經(jīng)驗,分析如下:養(yǎng)過細(xì)胞的童鞋大都有著這樣的共識:血清,由于其復(fù)雜的內(nèi)在成分和難以控制的外界因素,它既是細(xì)胞生長的bi備營養(yǎng),也是細(xì)胞死亡的致命du藥,當(dāng)我們廢寢忘食的,嘔心瀝血的,鞠躬盡瘁的養(yǎng)著細(xì)胞同時,也極有可能因為一時的疏忽和大意選錯了血清,導(dǎo)致珍貴的細(xì)胞意外身外,一切歸零,不得不洗心革面重頭開始!首先跟大家介紹幾種常規(guī)的...